Анализ потребления глюкозы и глутамата в питательных средах как метод оценки качества эмбрионов человека пятых суток раз

02-09-2018
 

Зорина И.М., Смольникова В.Ю., Эльдаров Ч.М., Ярыгина С.А., Горшинова В.К., Макарова Н.П., Калинина Е.А., Бобров М.Ю.

ФГБУ Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва

Цель исследования. Оценить изменение содержания глюкозы и глутамата в культуральных средах эмбрионов 5 суток развития методом флуориметрической детекции и определить ассоциацию исследуемых показателей с качеством и плоидностью эмбрионов.

Материал и методы. В ходе одномоментного исследования в параллельных группах были исследованы 68 образцов сред культивирования эмбрионов различного морфологического качества от 21 пациентки в возрасте до 45 лет, проходящих программу ЭКО (ИКСИ) с использованием препаратов гонадотропинов и с проведением преимплантационного генетического скрининга методом сравнительной геномной гибридизации по показаниям. Анализ потребления глюкозы и глутамата в средах культивирования эмбрионов (5 суток развития) проводился методом флуоресцентной фотометрии с использованием наборов реактивов Amplex Red Glucose Assay kit и Amplex Red glutamic Acid Assay kit (Molecular Probes, Life technologies).

Результаты. В результате исследования было установлено, что применение предложенных методических подходов позволяет регистрировать потребление глюкозы эмбрионами после пяти суток культивирования. Было показано, что для эмбрионов, демонстрирующих более высокие показатели развития к моменту исследования, характерен повышенный уровень потребления глюкозы. Также было установлено, что эмбрионы с нормальным и анэуплоидным кариотипом не проявляют достоверных отличий в потреблении глюкозы на пятый день культивирования. Оценка имплантационного потенциала и содержания глюкозы в питательных средах показала, что у эмбрионов с повышенным потреблением глюкозы возрастает вероятность развития беременности после переноса.

Заключение: На основании полученных данных, в перспективе можно рекомендовать предложенный метод измерения концентрации глюкозы в качестве дополнительного неинвазивного исследования для селективного переноса эмбрионов со сходными морфологическими параметрами.